全文获取类型
收费全文 | 2555篇 |
免费 | 126篇 |
国内免费 | 311篇 |
专业分类
林业 | 7篇 |
农学 | 71篇 |
基础科学 | 4篇 |
69篇 | |
综合类 | 887篇 |
农作物 | 25篇 |
水产渔业 | 167篇 |
畜牧兽医 | 1689篇 |
园艺 | 22篇 |
植物保护 | 51篇 |
出版年
2024年 | 4篇 |
2023年 | 18篇 |
2022年 | 84篇 |
2021年 | 89篇 |
2020年 | 81篇 |
2019年 | 102篇 |
2018年 | 49篇 |
2017年 | 101篇 |
2016年 | 119篇 |
2015年 | 101篇 |
2014年 | 142篇 |
2013年 | 127篇 |
2012年 | 215篇 |
2011年 | 230篇 |
2010年 | 150篇 |
2009年 | 172篇 |
2008年 | 112篇 |
2007年 | 157篇 |
2006年 | 172篇 |
2005年 | 128篇 |
2004年 | 75篇 |
2003年 | 67篇 |
2002年 | 57篇 |
2001年 | 55篇 |
2000年 | 51篇 |
1999年 | 31篇 |
1998年 | 42篇 |
1997年 | 25篇 |
1996年 | 29篇 |
1995年 | 27篇 |
1994年 | 25篇 |
1993年 | 23篇 |
1992年 | 18篇 |
1991年 | 16篇 |
1990年 | 23篇 |
1989年 | 19篇 |
1988年 | 17篇 |
1987年 | 9篇 |
1986年 | 5篇 |
1984年 | 3篇 |
1983年 | 2篇 |
1982年 | 2篇 |
1981年 | 3篇 |
1980年 | 6篇 |
1979年 | 3篇 |
1974年 | 1篇 |
1956年 | 5篇 |
排序方式: 共有2992条查询结果,搜索用时 15 毫秒
41.
42.
43.
44.
45.
为制备鲤春病毒血症病毒(SVCV)单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的SVCV免疫BALB/c鼠,通过杂交瘤细胞技术,制备2株抗SVCV的MAb,分别命名为2A3和3H7。经间接ELISA检测腹水效价为1:10240和1:12150。亚类鉴定证实,这2株亚类均为IgG1型。经非竞争酶免疫试验测定2A3和3H7的抗体亲和力常数分别为4.86×108L/mol和1.86×109L/mol,3H7相对亲和力高于2A3。MAb 2A3和3H7的饱和度均为1:400,叠加试验所得增值指数为63.2%,大于50%。抗体反应增值结果表明:两株MAb分别针对不同抗原位点。免疫印迹分析检测表明,两株纯化的MAb均可与SVCV抗原发生特异反应。 相似文献
46.
抗猪输血传播病毒1型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为制备抗猪输血传播病毒1型(TTV1) Cap蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究采用PCR法扩增TTV1ORF1 (1501nt~2475nt)编码重组Cap蛋白的C末端截短序列,将PCR产物克隆于pGEX-6P-1载体中,并在大肠杆菌Rosetta (DE3)菌株中诱导表达,获得含GST标签的重组蛋白(rCap),经SDS-PAGE和western blot鉴定表明rCap约为64.0.ku,以包涵体形式存在.用纯化的rCap免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗rCap蛋白的杂交瘤细胞株,MAb亚类均为IgGl/κ型;western blot鉴定表明有7株MAbs与rCap产生特异性反应,另1株MAb呈阴性.为验证8株MAbs与真核表达的Cap蛋白的免疫反应性,将全长与截短的TTV1ORF1基因片段克隆于pcDNA3.1载体,转染293T细胞进行蛋白瞬时表达,采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法检测表明,这8株MAbs均能够与瞬时表达的全长rCap产生特异性反应,其中6株与截短表达的rCap反应.本研究表达的rCap蛋白及制备的MAbs,为该病毒检测方法的建立及抗原表位的鉴定奠定了基础. 相似文献
47.
为建立蓝舌病病毒(BTV)的检测方法和研究该病毒蛋白的功能,本研究利用BTV血清8型(BTV8)免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾淋巴细胞与SP2/0细胞融合,制备单克隆抗体(MAb).并以BTV8作为包被抗原建立间接ELISA方法,经筛选获得了8株稳定分泌抗BTV8 MAb的杂交瘤细胞株(1B2、1F6、2B1、2D10、3B6、3D9、4D4和4D12).Western blot结果显示,MAb 1F6、2B1、2D10、3B6、3D9与BTV8 VP7蛋白反应,MAb B2、4D4、4D12与BTV8 NS2蛋白反应.间接免疫荧光结果显示,该8株MAb与24型BTV血清型呈不同的反应论系.本研究所获得的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究提供了实验依据. 相似文献
48.
为了研究Sf9细胞PHB2蛋白(Sf-PHB2)的功能及其对虾白斑综合症病毒(WSSV)极早期基因ie1的转录调控作用,本研究从昆虫细胞Sf9中扩增sf-phb2基因编码区,克隆至表达载体pET30a中,转化到大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达6His-Sf-PHB2重组蛋白.SDS-PAGE分析表明,表达的重组蛋白以... 相似文献
49.
为制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗M蛋白单克隆抗体(MAb),本研究以截短表达的His-M重组蛋白免疫BALB/c小鼠;以截短表达的GST-M重组蛋白作为包被抗原,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,得到一株稳定分泌抗M蛋白MAb.MAb亚类鉴定为IgG2b型,轻链为к链,杂交瘤细胞培养上清和诱导的小鼠腹水抗体效价分别为1:3000和1:2×105.Western blot试验表明该MAb能够识别重组及天然的PEDV M蛋白.间接免疫荧光试验表明该MAb能够与PEDV感染的Vero E6细胞产生特异性免疫荧光. 相似文献
50.
为了解不同疫苗生产厂家生产的新城疫灭活疫苗的免疫效果,更好地开展新城疫的免疫工作,选用国内4个厂家所生产的新城疫灭活疫苗,免疫商品蛋鸡,依据免疫前后、攻毒后抗体水平变化趋势和攻毒后对鸡群的保护力,评估4种ND油苗的免疫效果。结果表明:3和4号疫苗组死亡保护力均为100%,而且3号和4号疫苗组产生的抗体水平较高、提升时间较早;而1号和2号疫苗组均有死亡,并且抗体水平与3号和4号疫苗组相比较低。由试验可知,不同生产厂家所生产的ND油苗质量参差不齐,免疫效果有较大差异。 相似文献